Вы здесь

Главная

Взаимодействие репликативного белка а с функциональными структурами ДНК

ID_Статьи: 
179.00

Фактор репликации A (RPA) - гетеротримерный белок, обладающий высоким сродством к одноцепочечным ДНК и участвующий в процессах репликации, ре­парации и рекомбинации ДНК в клетках эукариот. С помощью метода фотоаф­финной модификации исследовано взаимодействие репликативного белка А че­ловека с ДНК-структурами, содержащими одноцепочечные бреши различного раз­мера (9, 13, 30 и 34 и.о.), ники и флэпы. Такие структуры, возникают в процессе репликации и репарации ДНК. Фотореакционноспособный остаток FAP-dUMP вводили в З'-конец бреши с помощью ДНК-полимеразы в присутствии фотореак-ционноспособного аналога dUTP. Олигонуклеотид, содержащий фотореакционос-пособную группу на 5'-концевом фосфате, был получен с помощью химического синтеза. Показано, что независимо от размера бреши с 5'-концом взаимодейству­ет в основном большая субъединица RPA (р70), тогда как характер взаимодей­ствия субъединиц RPA с З'-концом брешей зависит как от размера бреши, так и от концентрации белка. Преимущественное мечение р32-субъединицы RPA наблю­дается в протяженных брешах, при низкой концентрации белка. На основании полученных результатов была построена модель согласно которой происходит полярная ориентация RPA в одноцепочечных брешах. Предполагается, что поляр­ность RPA важна для позиционирования нуклеаз XPG и EXCC1-XPF, принимаю­щих участие в нуклеотидной репарации. Скорее всего полярная ориентация субъе­диниц репликативного белка А необходима для последующей сборки белков, уча­ствующих в репарации нуклеотидов.

 

Хлиманков Д.Ю.1, Ходырева С.Н.1,2, Колпащиков Д.М.1, Петрусева И.О.1, Речкунова Н.И.1, Лаврик О.И.1

1 Новосибирский институт биоорганической химии СО РАН, Новосибирск

2 Новосибирский государственный университет, Новосибирск