Вы здесь

Главная

Выход ДНК из митохондрий мозга гамма-облученных мышей

ID_Статьи: 
40.00

Повреждение митохондриальной ДНК (мтДНК) в результате действия радиации и других агентов, низкая эффективность систем репарации в митохондриях приводит к повышенной нестабильности митохондриального генома, которая может способствовать переносу фрагментов мтДНК в ядерный геном. Структурно-функциональные нарушения митохондриальной мембраны, возникающие при действии радиации, возможно, способствуют выходу из митохондрии ДНК и ее переносу в ядро. Однако не ясен вопрос, в каком виде высвобождается мтДНК, которая потенциально может быть перенесена в ядро: с сохранением структуры всей молекулы или в виде ее фрагментов. В настоящей работе мы исследовали возможность выхода ДНК из митохондрий мозга мышей и функциональное состояние этих органелл после радиационного воздействия. Для этого мышей линии C57BL/6 подвергали гамма-облучению (источник 60Со) в дозе 5 Гр. Митохондрии из мозга мышей выделяли методом стандартного дифференциального центрифугирования. МтДНК выделяли из лизатов митохондрий и цитозоля с использованием магнитных сорбентов. Методом ПЦР-амплификации длинных фрагментов мтДНК и использованием специфичных к ней праймеров, исследовали кинетику выхода ДНК из митохондрий в разные сроки после облучения животных. Результаты исследований показывают, что через 5 часов после облучения мышей в дозе 5 Гр в цитоплазматической фракции мозга появляются фрагменты мтДНК размером более 10 кb. Уровень амплификации этих фрагментов остается постоянным в течение двух суток после гамма-облучения мышей. Наблюдаемый эффект выхода фрагментов мтДНК в цитозоль связан с радиационным повреждением ДНК и мембран митохондрий мозга. Результаты также указывают на возможность длительного сохранения крупных фрагментов мтДНК в цитозоле клеток.

 

Патрушев М.В.1, Зобова В.Е.1, Касымов В.А.2, Ушакова Т.Е.1, Газиев А.И.1

1Институт теоретической и экспериментальной биофизики РАН, Пущино (Россия)

2Институт биофизики клетки РАН, Пущино (Россия)