Вы здесь

Главная

Внеклеточная протеазная активность микроорганизмов в щелочных гидротермах Баргузинской долины

ID_Статьи: 
82.00

Основными биотическими компонентами в гидротермах Байкальской рифтовой зоны являются бактерии, грибы и водоросли. Изучение активных внеклеточных гидролитических ферментов дает возможность оценки их участия в процессе трансформации органического вещества в гидротермах. Целью работы является изучение внеклеточной протеазной активности ПА в нативных образцах щелочных гидротерм Баргузинской долины.

Объектами нашего исследования являются источники Гарга, Сея, Уро, которые характеризуются высокими значениями температур (40-72,2°С) и рН (8.0-9,6).Для исследования были использованы маты, илы и растительные остатки (р.о.). Экстракты образцов для были приготовлены при помощи ультразвуковой (У) и механической обработки (М). В данных источниках характерно повышенное содержание белковых субстратов (от 0,35 до 5,3мг/мл). Наличие ПА в экстрактах природных образцов проводили по методу Эрлангера и определялось по результатам на их инкубации с различными синтетическими белоксодержащими субстратами протеаз ВАРА (п-нитроанилид бензоил-L-аргинина), ZAALp (п-нитроанилид Z-аланил-аланил-лейцина) и ГААЛП (Glp-ала-ала-лей-пара-нитроанилид) в течении 1 часа. Установлено, что максимальная удельная активность на трипсиноподобном субстрате ВАРА была обнаружена в источнике Гарга и составляла 8,65 ед/мг (У) и 3,37 ед/мг (М). Максимальная удельная активность по субстрату ГААЛП составляла 4.70 ед/мг (У) в источнике Гарга и 5,65 ед/мг (М) в источнике Сея. Максимальная удельная активность по субтилизиноподобному субстрату ZAALp была 6,98 ед/мг (У) в источнике Уро и 3,36 ед/мг (М) источнике Гарга. Эти исследования показали, что наибольшая ПА была обнаружена в экстрактах при ультразвуковой обработке.

 

Шагжина А.П., Лаврентьева Е.В., Базаржапов Б.Б.

Институт общей и экспериментальной биологии СО РАН, Улан-Удэ (Россия)