Вы здесь

Главная

Влияние ионов кальция на динамику связывания негистонового белка хроматина HMG1 с ДНК

ID_Статьи: 
156.00

В работе было исследовано влияние ионного состава раствора на взаимо­действие ДНК с негистоновым белком хроматина HMG1 и рекомбинантным белком HMG(A+B), который отличается от HMG1 отсутствием неупорядочен­ного С-концевого участка. Особенности связывания этих белков с ДНК были изучены нами ранее, в данной работе основное внимание уделялось влиянию на взаимодействие ионов кальция. Способность ионов Са2+ влиять на конфор-мацию макромолекул и их специфическое взаимодействие широко известна. Для исследуемых систем представляет особый интерес конденсация ДНК-бел­ковых комплексов в присутствии ионов Са2+, поскольку такие комплексы явля­ются потенциально трансфекционно-активными. Также влияние ионов кальция позволяет получить дополнительную информацию о динамике образования и агрегации комплексов. Исследование проводили с помощью оптических методов (круговой дихроизм, УФ поглощение). Изучали изменения спектров сис­тем как при увеличении концентрации ионов Са2+ и фиксированном соотно­шении белок/ДНК в системе, так и при фиксированном ионном составе и увеличении содержания белка в системе.

Проведенные исследования выявили различие влияния ионов Са2+ на комп­лексы полноразмерного и укороченного белка, причем эффект сильно зависел от ионной силы раствора. Комплексы HMGl/ДНК при низких соотношениях бе­лок/ДНК более конформационно устойчивы к повышению концентрации Са2+, чем белок или ДНК в отдельности. При повышении концентрации белка в сис­теме наблюдается довольно резкая Са2+-зависимая агрегация комплексов. Состоя­ние с аномально высокой оптической активностью, наблюдающееся в системах HMG1(A+B)/ДНК в растворе 0,15 М NaCl, разрушается под воздействием ионов Са2+, что является еще одним косвенным подтверждением их высокой упорядо­ченности.

 

Скворцов А.Л.1, Чихиржина Е.В.1, Поляничко A.M.1,2, Воробьев В.И.1,2

1 Институт цитологии, Санкт-Петербург

2 Санкт-Петербургский государственный университет, Санкт-Петербург