Вы здесь

Главная

Влияние гипертонического раствора сахарозы и 5- ( N,N- гексаметил ) -амилорида на рецептор-опосредованный и жидкофазный эндоцитоз в клетках А431

ID_Статьи: 
178.00

Связывание рецептора с эпидермальным фактором роста (ЭФР) на поверх­ности клетки стимулирует интернализацию лиганд-рецепторного комплекса. Традиционно считается, что рецептор ЭФР поступает в клетку через клатрин-окаймленные ямки. При низких концентрациях в среде этот комплекс поступа­ет в клетку с высокой скоростью. Мы обнаружили, что при высоких концентра­циях ЭФР поступление комплекса ЭФР-рецептор (ЭФР-Р) не выходит на плато, а продолжается с кинетикой, характерной для интернализации жидкофазных мар­керов. Целью настоящей работы являлось выяснение возможности поступле­ния комплексов ЭФР-Р внутрь клеток по клатрин-независимому пути. В каче­стве модели использовали клетки эпидермоидкой карциномы человека линии А431. Мы применили два широко описываемых в литературе подхода. Рецеп­тор-опосредованный эндоцитоз блокировали гипертонической средой, создавае­мой с помощью 0,4 М сахарозы, клатрин-независимый эндоцитоз блокировали 5-(М,Ы-гексаметил)-амилоридом (ГМ-амилоридом). При использовании 1125-ЭФР было показано, что в гипертонической среде внутриклеточное накопление ком­плекса ЭФР-Р шло менее интенсивно, чем в контроле. Однако, было обнаружено, что в присутствии 0,4 М сахарозы доля погибших клеток чрезвычайно велика (около 50%). Надо заметить, что суммарное количество метки, которая связа­лась с клеткой, уменьшается не пропорционально количеству поврежденных кле­ток. Отсюда можно сделать вывод о том, что гипертоническая среда действи­тельно уменьшает интернализацию комплексов ЭФР-Р. Мы показали, что ГМ-амилорид не влияет на эндоцитоз рецептора ЭФР, однако снижает поступления жидкофазного маркера пиноцитоза (уранина) в эндосомы. Исходя из получен­ных результатов, можно заключить, что значительная часть жидкофазного марке­ра выступает как пассивный «пассажир» клатрин-окаймленных везикул.

 

Харченко М.В., Аксенов Н.Д., Корнилова Е.С.

Институт цитологии РАН, Санкт-Петербург