Вы здесь

Главная

Влияние брефельдина А на пролиферацию и морфогенную активность каллусных культур гречихи

ID_Статьи: 
4.00

Изучали влияние ингибитора секреции белков и полисахаридов брефельдина А (БФА) на пролиферацию и морфогенную активность каллусных культур гречихи. В опытах использовали морфогенный (МК) и неморфогенный (НК) каллусы гречихи татарской Fagopyrum tataricum (L.) Gaertn. Каллусы выращивали в течение месяца с добавлением БФА (2.5 мкг/мл) на среде RX, поддерживающей пролиферацию, или на среде RXR, индуцирующей геммогенез в МК. Затем культуры переносили нате же среды без ингибитора. Установлено, что НК оказался более чувствительным к ингибитору по сравнению с МК: БФА полностью ингибировал пролиферацию НК и значительно снижал прирост биомассы МК (в 4 раза по сравнению с контролем). В МК полностью подавлялся процесс воспроизводства проэмбриональных клеточных комплексов (ПЭКК). Цитогенетические исследования выявили нарушение процессов цитокинеза в неморфогенном каллусе, которое выражалось в формировании многоядерных клеток (20%), в морфогенном каллусе многоядерных клеток не было обнаружено. После переноса на среду без ингибитора МК восстанавливали способность к делению и образованию ПЭКК, тогда как клетки НК не приступали к делению и после удаления ингибитора. Выращивание МК на среде RXR полностью подавляло в нем регенерационные процессы, причем перенос на среду без БФА не восстанавливал в нем ни пролиферативную, ни морфогенетическую активность. Биохимические исследования показали, что после 2-х недель культивирования МК на среде RX с добавлением БФА количество секретируемых на поверхность белков уменьшалось в 20 раз. Причем, секреция полипептидов 14-21 кДа подавлялась наибольшим образом.

Таким образом, БФА может быть использован как удобный инструмент для исследования вклада секретируемых белков в регуляцию морфогенеза in vitro.

 

Акулов А.Н, Лебедева В.В., Мухитов А.Р., Лопухов Л.В., Румянцева Н.И.

Казанский Институт Биохимии и Биофизики КНЦ РАН