Вы здесь

Главная

In vitro экспрессия псевдогена церулоплазмина в клетках человека

ID_Статьи: 
8.00

У млекопитающих одним из ключевых участников переноса железа через клеточные мембраны и транспорта неклеточной меди является медьсодержащая ферроксидаза церулоплазмин (ЦП). Помимо плазматической мембраны, в клетке существуют компартменты (например, митохондрии), перенос в которые ионов железа, вероятно, сопряжен с ферроксидазной реакцией. Для установления ясности в вопросе о возможности существования ЦП-подобного белка в митохондриях млекопитающих мы использовали методы компьютерного и биохимического анализа, результаты которого представлены в данной работе. Компьютерный анализ последовательности псевдогена ЦП показал, что он может кодировать потенциальную оксидазу, содержащую в центре молекулы медьсвязывающий мотив Гис-Х-Гис, состоящую из 303 аминокислот и на N-конце содержащую сигнал доставки в митохондрии. Молекулярная масса «зрелого» псевдоЦП может составлять примерно 30 кДа. Методом ОТ-ПЦР показано, что в культивируемых клетках человека линий HepG2 и HuTu 80, присутствует продукт транскрипции псевдогена ЦП. В клетках линии HuTu 80 известные продукты транскрипции гена ЦП не выявлены. Во фракции митохондрий и внутренних мембран, полученных из клеток линии HuTu 80, методом иммуноблоттинга найдены полипептиды ЦП с молекулярной массой около 30 кДа. Данные, представленные в работе, позволяют однозначно считать, что у человека на участке генома, занимаемом псевдогеном ЦП, возникла последовательность, содержащая все элементы, характерные для эукариотического гена класса II. Его предполагаемым белковым продуктом может быть митохондриальный ЦП-подобный белок. Этот ген проявляет активность в некоторых культивируемых клетках. В работе обсуждается возможная роль митохондриального ЦП-подобного белка.

 

Васин А.В,, Повалихин Р.Г.2, Платонова Н.А.2

1Санкт-Петербургский Государственный Политехнический Университет, Санкт-Петербург (Россия)

2 Научно-Исследовательский Институт Экспериментальной Медицины РАМН, Санкт-Петербург (Россия).