Вы здесь

Главная

Тиреотропин in vivo активирует кальпаины в щитовидной железе крыс

ID_Статьи: 
107.00

Кальпаины (кальций-зависимые нейтральные протеиназы) играют важную роль в ограниченном протеолизе различных цитоструктур, обеспечивая пролиферацию, адгезию и двигательную активность клеток. Тем не менее, механизмы активации кальпаинов до настоящего времени остаются малоизученными. В наших ранних исследованиях была обнаружено, что тиреотропин (ТТГ) активирует кальпаины в суспензии тиреоцитов крыс. Целью настоящей работы было проверить, способен ли ТТГ активировать in vivo кальпаины в клетках щитовидной железы крыс.

Исследования выполнены на 80 белых нелинейных крысах-самцах. Ткань щитовидной железы гомогенизировали, затем центрифугировали 10 минут при 1000 g. Осадок ресуспендировали, а супернатант центрифугировали дважды - 30 минут при 20 ООО g и 120 минут при 105 000 g. Полученный после каждого центрифугирования осадок также ресуспендировали и использовали для определения активности кальпаинов. Активность кальпаинов определяли спектрофотометрически по скорости гидролиза денатурированного казеина и спектрофлюориметрически - по гидролизу субстрата N-Succinyl-Leu-Leu-Val-Tyr 7-amido-4-methylcoumarin. Активность кальпаинов обнаруживается в микросомальной (105 000 g), митохондриальной (20 000 g) и, в незначительных количествах, в ядерной (1000 g) фракциях. Эти результаты хорошо согласуются с данными по субклеточной локализации Са2+-зависимых протеиназ в других органах. Через 4 часа после внутрибрюшинного введения ТТГ отмечается рост активности кальпаинов в митохондриальной и микросомальной фракциях. Курсовое введение ТТГ в течение 5 дней также вызывает активацию кальпаинов в щитовидной железе. Семидневное введение Т3, которое вызывает падение сывороточного уровня ТТГ, приводит к снижению активности кальпаинов в митохондриальной и микросомальной фракциях. Таким образом, впервые in vivo получены данные о чувствительности системы тиреоидных Са2+-зависимых протеиназ к гипофизарному тиреотропному гормону.

 

Леликов Д.С., Пляхин И.В., Кременецкая Т.В., Кочуков М.Ю.

Рязанский государственный медицинский университет, Рязань (Россия).