Вы здесь

Главная

Температурная зависимость кинетических характеристик ацетилхолинэстеразы мембран синаптосом коры головного мозга крыс

ID_Статьи: 
85.00

Ацетилхолинэстераза (АХЭ) является одним из ключевых ферментов холинергической нейромедиаторной системы мозга. Одной из особенностей фермента является наличие субстратного ингибирования, механизм и биологический смысл которого остается невыясненным. Исследование температурных зависимостей кинетических характеристик АХЭ позволит глубже понять детали каталитического механизма фермента. Источником фермента служили мембраны синаптосом из коры головного мозга крыс. Активность АХЭ определяли методом Ellman et al. (1961) с ацетилтиохолином (ATX) в качестве субстрата.

Оказалось, что при 37°С концентрационная зависимость активности АХЭ имеет оптимум (Sopt) при 0,5 мМ. Снижение температуры инкубации с 37°С до 10°С приводит к падению активности АХЭ во всем диапазоне исследованных концентраций субстрата (1,5*10-5-8*10-3М). При этом не изменяется положение оптимума, но уменьшается степень субстратного ингибирования фермента. Связывание АТХ с ферментом носит кооперативный характер. Значение пн зависит от температуры инкубации. При t < 20-23°С кооперативность АХЭ исчезает. Именно в этой области температур обнаружены также изломы на графиках температурной зависимости Vm и Кт фермента. Оказалось, что на температурную зависимость активности АХЭ влияет концентрация субстрата. При S < Sopt на графике зависимости активности АХЭ в координатах Аррениуса обнаруживается излом при температуре 22°С, а при S > Sop1 (2мМ, область субстратного ингибирования) на графике излом отсутствует. Полученные результаты позволят развить теорию каталитического механизма АХЭ и представить более полную картину функционирования его in vivo.

 

Меджидова A.M., Кличханов Н.К., Мейланов И.С.

Дагестанский государственный университет, Махачкала