Вы здесь

Главная

Структурная модификация белка полосы 3 и везикуляция эритроцитов

ID_Статьи: 
29.00

Ранее в нашей лаборатории было показано, что при окислительном стрессе в эритроцитах происходит усиление процесса везикуляции и образование на поверхности клеток "антигенов старения", которые могут рассматриваться как агрегированное состояние белка полосы 3. Цель данной работы - выяснить роль структурной модификации белка полосы 3 в процессе везикуляции эритроцитов человека при действии на клетки трет-бутилгидроперекиси (t-BHP) и диамида. Известно, что диамид, являясь бифункциональным SH-реагентом, при действии на эритроциты "сшивает" SH-группы белков мембранного скелета, не окисляя при этом гемоглобин. Окислительное повреждение эритроцитов, индуцированное t-BHP, вызывает деградацию спектрина и анкирина с одновременным связыванием гемоглобина с мембраной. В работе были использованы эритроциты доноров и изолированные из них мембраны. О степени микровезикуляции эритроцитов судили по активности ацетилхолинэстеразы в супернатантах, полученных после осаждения метаболически истощенных эритроцитов. Изменение структурного состояния белка полосы 3 оценивали, используя флуоресцентные метки 4,4'-диизотиоциано-стильбен-2,2'дисульфокислота (ДИДС), связываю­щегося с цитоплазматическим доменом белка полосы 3, и флуоресцеинизотиоционат, конъюгированный с конканавалином А (ФИТЦ-кон А), который специфически взаимодействует с углеводными остатками белка полосы 3. Обнаружено, что в результате метаболического истощения эритроцитов, предварительно подвергшихся воздействию как 1-5 мМ диамида так и 0,25-1 мМ t-BHP, происходит увеличение степени везикуляции клеток. Параллельно выявлено, что после обработки эритроцитов диамидом и t-BHP происходит снижение интенсивности флуоресценции связанных с мембранами эритроцитов ФИТЦ-конканавалина А и ДИДС. Полученные данные свидетельствуют о том, что диамид и t-BHP оказывают прямое влияние на структурную организацию белка полосы 3, что вызывает ускорение процесса везикуляции эритроцитов.

 

Лукьяненко Л.М., Козлова Н.М.

Институт фотобиологии НАНБ, Минск (Беларусь)