Вы здесь

Главная

Создание генетической конструкции для получения трансгенных растений-биопродуцентов интерлейкина-18 человека и анализ её экспрессии в трансгенных растениях табака

ID_Статьи: 
117.00

Известно, что провоспалительный медиатор иммунного ответа - ннтерлейкин-18 (ИЛ-18) является перспективным противораковым препаратом, однако спектр его возможного применения всё ещё до конца не раскрыт. На сегодняшний день источникам рекомбинантного ИЛ-18 человека служат клетки Е. coli. Исследования проведённые за последнее десятилетие показали, что по сравнению с традиционными системами на основе бактерий, дрожжей и клеток млекопитающих, генетически модифицированные растения могут служить более дешёвым источником рекомбинантных белков. Таким образом, трансгенные растения-продуценты ИЛ-18 человека смогли бы составить достойную альтернативу прокариотическим клеткам.

В рамках данной проблемы нами была поставлена задача изучить возможность экспрессии ИЛ-18 человека в растениях табака. Для этого, на основе экспрессирующей системы pRTL2, содержащей сильный конститутивный промотор 35S гена вируса мозаики цветной капусты, бинарного вектора pBi 101 и кодирующего участка кДНК гена ИЛ-18 человека, была создана генетическая конструкция для трансформации растений. Методом агробактериального переноса получено 30 исходных трансформантов табака (Nicotiana tabacum. линия SRI). Сегрегационным анализом на селективной среде были отобраны предположительно моноинсерционные растения. Трансгенный статус трансформантов подтверждён PCR-анализом, а моноинсерционность - Саузерн блот анализом. Ведется работа по анализу уровня экспрессии трансгена методами ИФА.

 

Турчинович А.А.1, Загорская А.А.1, Филипенко Е.А.1, Филипенко M.JI.2, Дейнеко Е.В.1

1Институт Цитологии и Генетики СО РАН, Новосибирск (Россия),

2Институт Биоорганической Химии СО РАН, Новосибирск (Россия).