Вы здесь

Главная

Системный подход в флуоресцентной спектроскопии

ID_Статьи: 
68.00

Данные, получаемые различными методами, часто дают отличающиеся зна­чения оцениваемых параметров. Это относится в первую очередь к системам, в которых трудно учесть все возможные воздействия. К такого рода системам относится, например, исследование взаимодействий гидрофобных соединений в водных растворах. Для устранения отличия параметров, полученных с помо­щью разных методов, можно использовать обобщенную модель. Конечно, число неизвестных параметров в этом случае растет. Как, впрочем, и число связыва­ющих эти параметры уравнений. Системный подход позволяет выявить облас­ти наибольшего несоответствия данных и расширить рамки применимости ис­пользуемых методов.

Произведено сопоставление результатов измерения флуоресцентных (ФЛ) свойств взаимодействия шпилечного олигонуклеотида и 7-аминоактиномицина Д (7аАД) различными методами в наномолярной области концентраций. Вы­полнялось измерение интенсивности ФЛ, степени деполяризации ФЛ и снятие корреляционной функции флуктуации ФЛ в малом (порядка фемтолитра) объе­ме исследуемого образца. В изучаемом диапазоне концентраций крайне высока адсорбция 7аАД даже в присутствии альбумина, являющегося эффективным агентом для снижения сорбции. В первоначальной схеме не использовались данные флуоресцентной корреляционной спектроскопии (ФКС), что обусловило необходимость учитывать адсорбцию для корректной интерпретации экспери­ментальных данных. Адсорбция учитывалась по эмпирическому уравнению Фрейндлиха с заранее неизвестными значениями параметров. Тем не менее, удовлетворительного согласия с экспериментальными данными не наблюдалось. Добавление данных ФКС в модель позволило не учитывать адсорбцию, считая заранее неизвестной концентрацию красителя, связавшегося с гетерогенной по­верхностью стекла кюветы. Это заметно повлияло на качество модели, обеспе­чив необходимую степень ее самосогласованности.

 

Ковалев А.Э.

Институт биофизики клетки РАН, Пущино