Вы здесь

Главная

Роль факторов контактной активации свертывания крови в протеолизе церулоплазмина

ID_Статьи: 
159.00

Церулоплазмин (ЦП) - основной медьсодержащий односубъединичный бе­лок плазмы крови млекопитающих с Mr - 132 кДа. Выделенные без ингибито­ров протеаз, препараты ЦП чрезвычайно легко подвергаются спонтанному протеолизу, за исключением ЦП некоторых видов дельфинов. Используемые сегод­ня методы выделения ЦП не позволяют получать стабильный белок, несмотря на применение в процессе выделения различных ингибиторов протеиназ. Протеа-за, ответственная за протеолиз ЦП, до сих пор не идентифицирована.

Среди исследованных нами ингибиторов протеаз, ЭДТА, ФМСФ, 6-аминокапроновая кислота, аргинин, лизин, бензамиидин и 8-оксихинолин, только гепа­рин, впервые использованный нами для этих целей, эффективно препятствовал протеолизу ЦПЧ. При хроматографии препарата ЦПЧ на Гепарин-Сефарозе был выделен белок, протеолизующий ЦПЧ за 3 дня.

ЦП выделяли методом аффиной хроматографии на аминоэтил-(АЕ)-Агаро-зе, синтезированной нами по методу Mateescu. ЦПЧ выделенный без ингибито­ров протеаз он протеолизуется за 20 дней по результатам ДЦС-Na ПААГ элек­трофореза. Препараты ЦП дельфинов (Черноморской афалины и Белухи даль­невосточной), в крови которых отсутствуют 4 фактора свертывания крови (ФСК), F XII, F XI, F IX и прекалликреин (РК), оказались устойчивы к спонтанному протеолизу. Этот факт, а также опыты с гепарином позволили нам думать о возможном участии в протеолизе ЦП ФСК. ЦПЧ, выделенный из сыворотки крови, обработанной BaS04 (адсорбция витамин-К-зависимых ФСК, в том числе F IX), оказался менее стабильным, чем ЦПЧ контроля. При адсорбции факторов контактной активации, F XII, F XI и РК, на кварцевом стекле был впервые полу­чен препарат ЦПЧ, стабильный в течение более чем 2-х месяцев.

 

Соколов А.Р., Соловьев К.В.

НИИ Экспериментальной медицины, Отдел молекулярной генетики, Санкт-Пе­тербург