Вы здесь

Главная

Рестрикционный анализ гена NAT1 у европеоидов Западной Сибири

ID_Статьи: 
49.00

У человека N-ацетилирование и О-ацетилирование ароматических и некоторых гетероциклических аминов осуществляется двумя ариламин N-ацетилтрансферазами (Е.С. 2.3.1.5.). Ген NAT1 локализован области 8р22 и имеет длину 870 п.н. Изначально NAT1 был определен как мономорфный фермент, но в дальнейшем были выявлены мутации, которых к настоящему времени обнаружено 28, в различных комбинациях образующих 26 аллелей. Полиморфизм NAT1 характеризуется этническими различиями, но у европеоидов России остается неизученным. Целью нашей работы являлось определение частот встречаемости мутаций в гене NAT1 и подбор эндонуклеаз рестрикции для их обнаружения при помощи ПДРФ-анализа.

Из лимфоцитов периферической крови 74 здоровых европеоидов г. Новосибирска была выделена ДНК и амплифицирован фрагмент размером 1552 п.н. Для подбора эндонуклеаз предварительно были определены положения сайтов рестрикции для разных эндонуклеаз в первичной последовательности гена NAT1 (GenBank, Асе. Number XI7059) с использованием программы Dnasis. В результате для обнаружения мутаций 402Т>С и D1105 предложено использовать эндонуклеазу рестрикции Bst2UI, а для обнаружения мутаций 752А>Т и D1025 - Bst4CI. Методом ПДРФ-анализа в гене NAT1 определяли 7 мутаций (5 из них находятся в кодирующей области гена, а 2 - в некодирующей): 97С>Т при помощи эндонуклеазы рестрикции BgHI; 190ОТ - Sse9I; 350,351G>C - PspN4I; 402T>C -Bst2UI; 752A>T - BgHI и Bst4CI; D1025 - Bst4CI; D1105 - Bst2UI.

В результате исследования обнаружен один аллель с мутацией А752Т (частота составляет 0.007). Остальные 6 исследованных мутаций в данной выборке не обнаружены.

 

Никишина М.В., Акишев А.Г.

Институт молекулярной биологии и биофизики СО РАМН, Новосибирск (Россия).