Вы здесь

Главная

Разработка магнитных иммуносорбентов для выделния физиологически активных веществ

ID_Статьи: 
115.00

По сравнению с обычными иммуносорбентами (ИС) аффинные сорбенты с магнитными свойствами имеют ряд преимуществ, что позволяет их использо­вать для выделения физиологически активных веществ из суспензий. Целью нашей работы была разработка магнитного ИС для выделения противостафило-кокковых антител из отходов гамма-глобулииового производства.

ИС получали путем включения магнитного порошка ПМ-1 марки Б в поли-акриламидную матрицу с последующей активацией и ковалентной иммобили-за-цией очищенного стафилококкового альфа-токсина (CAT). Для проверки сте­пени защиты ПМ к сорбенту добавляли 5-аминосалициловую кислоту и Н202 и инкубировали 5 мин. Нами были получены несколько вариантов ИС , отличаю­щиеся по способу защиты ПМ от водной среды, и изучены их свойства - ем­кость, степень очистки целевого продукта и стабильность. Показано, что время, необходимое для связывания антител с полученными ИС, составляет 1 мин, пос­ле чего емкость сорбента уже не возрастает. Очевидно, что для достижения максимальной эффек-тивности ИС в качестве лиганда необходимо использо­вать высокоочищенный CAT. CAT очищали адсорбционной хроматографией на МПС-250-ГХ (удельная активность CAT - 39 ООО ГЕ/ОП280 ) с последующей до-очисткой на Сефадексе G-75 (удельная активность 55000 ГЕ/ОП280 ), где ГЕ -гемолитические единицы по гемолизу эритроцитов кролика, а ОП280 - оптичес­кая плотность препаратов при 280 нм. При выделении антител к CAT из экст­ракта осадка Б на иммуносорбентах с иммобилизованным CAT различной сте­пени очистки показано, что их емкость практически не отличается (1,8 и 1,7 ME анти-САТ на 1 мл колонки ИС), тогда как удельная активность антител, элюиро-ванных с ИС с иммобилизованным высокоочищенным CAT, в 2,5 раза выше удельной активности анти-САТ, полу-ченных на ИС с иммобилизованным ме­нее очищенным CAT.

 

Новак Д.И.

Институт биологии Уфимского научного центра РАН, Уфа