Вы здесь

Главная

Разработка иммунохимического метода определения гербицида атразина на основе комплемент-зависимого лизиса липосом

ID_Статьи: 
27.00

Липосомы с инкапсулированным маркером (флуоресцентный краситель, фермент) являются эффективным инструментом для детекции биологически активных соединений.

Разработана система гомогенного липосомального иммуноанализа (ЛИА) на основе комплемент-зависимого лизиса липосом для детекции атразина - гербицида триазинового ряда, - широко используемого в сельском хозяйстве. Липосомы, полученные методом обращения фаз из смеси яичный лецитин-холестерин-дицетилфосфат и конъюгата атразин -димиристоилфосфатидилэтаноламин, были нагружены флуоресцентным маркером - кальцеином. В инкапсулированном виде кальцеин характеризуется свойством самотушения. Принцип детекции заключается во взаимодействии антител против атразина с липосомальным антигеном с последующим специфическим лизисом липосом под действием системы комплемента и измерением флуоресценции кальцеина в растворе. При добавлении в систему свободного атразина, конкурирующего за центры связывания антител, степень лизиса липосом и измеряемая интенсивность флуоресценции уменьшаются пропорционально концентрации определяемого гербицида. Установлены концентрации реагентов и длительность иммунохимических реакций, оптимальные для целей анализа. Разработанный метод позволяет детектировать атразин в концентрации до 40 пг/мл в течение 30 минут, что представляет практический интерес, т.к. превосходит чувствительность и экспрессность стандартных твердофазных систем иммуноанализа этого соединения.

 

Гендриксон О.Д.1. Ярков С.П.2, Скопинская С.Н.2, Жердев А.В.1, Дзантиев Б.Б.

1Институт биохимии им. А.Н. Баха РАН, Москва (Россия)

2ГНИИ биологического приборостроения, Москва (Россия)