Вы здесь

Главная

Повышение чувствительности метода определения молекул средней массы в плазме крови

ID_Статьи: 
74.00

В патогенезе критических состояний важную роль отводят эндогенной инток­сикации, обусловленной образованием и выходом з кровь продуктов протеолиза белка - пептидов с молекулярной массой 300-5000 Да, называемых молекулами средней массы (МСМ). Определение МСМ, как универсальных маркеров эндогенной интоксикации, получило широкое распространение. Однако общепринятый метод, предложенный Н.И. Габриэлян и основанный на прямой УФ-спектрофотометрии депротеинизированного супернатанта, имеет низкую специфичность из-за поглощения в этой области кроме пептидов и аминокислот различных классов биологических соединений (мочевины, мочевой кислоты, нуклеотидов, рибофлавина, НАДФН2, НАД и др.).

Цель данной работы - повышение чувствительности метода определения МСМ в плазме крови. За основу был принят известный факт увеличения оптической плотности и длинноволновой сдвиг максимума поглощения тирозина в щелочной среде.

Нами обнаружено, что при смещении рН среды с б до 13 аналогичные изменения имеют место и в спектре УФ поглощения МСМ, которые обусловлены находящимся в их составе тирозином: максимум поглощения приходится на область 290 нм, при этом значение оптической плотности образца увеличивается на 25-30%. В тоже время УФ поглощение других компонентов плазмы (триптофана, глюкозы, мочевины, АТФ) уменьшается.

На основании полученных результатов, мы предлагаем повысить чувствительность существующего метода определения МСМ путем измерения,. УФ-поглощения супернатанта, разведенного боратным буфером (рН 13,0), при длине волны 290 нм.

 

Лобко Н.Ф.

Институт фотобиологии НАН Беларуси, Минск (Беларусь)