Вы здесь

Главная

Потенциометрический иммуносенсор для определения Escherichia coli

ID_Статьи: 
94.00

При помощи стандартных микробиологических методов можно определять единичные бактерии, но анализ включает в себя комплексные серии тестов, что требует значительных затрат времени (до 72 ч). Применение иммуносенсоров позволяет значительно сократить продолжительность анализа при сохранении высокой чувствительности, а также определять бактерии в сложных образцах (кровь, плазма, моча или пища) с минимальной предварительной обработкой пробы.

Цель исследования: разработка метода иммуносенсорной детекции микроорганизмов на примере убитых клеток Escherichia coli.

Преобразователем сигнала сенсора являлся рН - чувствительный полевой транзистор. Формирование рецепторного элемента сенсора осуществляли по схеме дот-блот иммуноанализа, где в качестве фермента-маркера использовали пероксидазу хрена.

В ходе проведенных исследований были оптимизированы концентрации иммунореагентов, блокирующего раствора и субстратов фермента. Получены калибровочные зависимости сигналов иммуносенсора от концентрации клеток микроорганизмов. Иммуно сенсор позволял осуществлять детекцию микроорганизмов на уровне 103 кл/мл (нижний предел), что свидетельствует о достаточно высокой чувствительности созданного метода. Объем тестируемого образца составлял 1 мкл без предварительного обогащения; время анализа не превышало 3-х часов. Использование несложной аппаратуры дает возможность проводить такой иммуносенсорный анализ непосредственно на месте отбора образца.

Авторы выражают благодарность за сотрудничество Бекетову С.Ф. и Потапову В.Д. (лаборатория молекулярной патологии, ГНЦ прикладной микробиологии, г. Оболенск). Работа выполнена под руководством д.х.н. Решетилова А.Н.

 

Плеханова Ю.В.1, Баранова Е.В.2

1Институт биохимии и физиологии микроорганизмов им. Г.К. Скрябина РАН, Пущино (Россия),

2ГНЦ прикладной микробиологии, Оболенск (Россия).