Вы здесь

Главная

Получение антипептидных антител против консервативного участка оболочечного бейка вируса гепатита С

ID_Статьи: 
86.00

Вирус гепатита С (ВГС) является причиной парентерального гепатита, часто развивается в хроническую форму и приводит к циррозу печени и гепатоклеточной карциноме. В настоящее время не существует ни вакцины, ни эффектив­ной терапии против вируса гепатита С. Обнаружение участков оболочечного белка ВГС, инициирующих образование нейтрализующих и протективных анти­тел к вирусу сделало бы возможным создание эффективной вакцины и тера­пии против ВГС. Анализ литературных данных и аминокислотной последова­тельности оболочечных белков ВГС позволил выбрать высококонсервативный участок для получения антипептидных антител. Использование различных алго­ритмов предсказания позволяет рассчитывать на высокую антигенность Пепти­да и возможность вируснейтрализующей активности антипептидных антител к этому участку. Участок оболочечного белка был синтезирован в двух модифи­кациях - циклической и линейной твердофазным методом с использованием Fmoc-стратегии. Удовлетворительное качество синтеза пептидов подтвержде­но масс-спектрометрическим анализом. Для иммунизации использовали белых беспородных мышей и кролика, пептиды использовали в виде конъюгатов с белками-носителями. Циклическую форму пептида конъюгировали с овальбу-мином, а линейную со стрептавидином. Кролика иммунизировали циклической формой пептида, а мышей как циклической, так и линейной. Сыворотки крови животных были тестировны методом иммуноферментного анализа. В резуль­тате проведенной работы, были получены антипептидные антитела к цикличес­кой форме пептида у кролика и у мышей с различным титром. Получение анти­тел к линейной форме оказалось менее удачным и требует подбора другого белка-носителя. Дальнейшая работа будет направлена на получение наиболее аффиных антител и проверку их нейтрализующей активности.

 

Кураева Т.Е., Оленина Л.В.

Государственное учреждение научно-исследовательский институт биомедицин­ской химии РАМН, Москва