Вы здесь

Главная

Полигалактуроназы Aspergillus niger и Penicillium dierckxii: получение, выделение, очистка

ID_Статьи: 
29.00

Одним из основных источников получения пектолитических ферментов а-1,4-В-полигалактуроназ (ПГ, КФ 3.2.1.15), являющихся важным инструментом для исследования структуры пектиновых полисахаридов, служат мицелиальные грибы. Данная работа посвящена сравнительному изучению особенностей продуцирования полигалактуроназы мицелиальными грибами Aspergillus niger ВКМ F-1119 и Penicillium dierckxii ВКПМ F-152, а также разработке эффективного способа очистки фермента. Нами показано, что A niger и P. dierckxii осуществляют биосинтез ПГ с активностью фермента, обусловленной типом пектина-индуктора. Свекловичный пектин индуцирует ПГ с активностью 23,9 и 32,6 ед/мл, цитрусовый пектин -10,8 и 20,7 ед/мл, яблочный пектин - 12,8 ед/мл и 21,4 ед/мл соответственно для каждого вида грибов. Эффективным индуктором ПГ (36,6 ед/мл) Р dierckxii является зостеран, уникальный апиогалактуронановый пектин морских трав сем. Zoster aceae. Максимальная ПГ-активность в культуральной жидкости наблюдается при культивировании A. niger в среде с кислыми исходными значениями рН в диапазоне 2-4 (оптимум 3,0). У P. dierckxii биосинтез ПГ существенно не зависит от рН среды и достаточно высокие значения ПГ-активности наблюдаются в кислом и в щелочном диапазонах исходных значений рН среды (в пределах от 2 до 8). ПГ обеих культур проявляет максимальную каталитическую активность при рН 5,0. Оптимум температуры для ПГ A. niger составляет 50° С, а для ПГ P. dierckxii - 60° С. Разработан комбинированный способ получения очищенных ферментных препаратов полигалактуроназы, включающий эксклюзионную, ионообменную и адсорбционную хроматографию. Конечное значение удельной ПГ-активности препарата составило 3385 ед/мг белка, что соответствует степени очистки в 21,7 раза.

 

Елькина Е.А. Шубаков А.А., Донцов А.Г.

Институт физиологии Коми научного центра Уральского отделения РАН, Сыктывкар (Россия)