Вы здесь

Главная

Оценка влияния алкилирующих агентов на геном земноводных методом "КОМЕТА-ТЕСТ"

ID_Статьи: 
87.00

В связи с увеличивающейся антропогенной нагрузкой на окружающую среду актуальной задачей является внедрение в биомониторинг новых методов, которые позволили бы производить комплексную оценку влияния различных факторов на биосистемы. Целью настоящей работы была оценка генотоксических эффектов алкилирующих соединений с использованием метода "комета-тест". Метод основан на анализе картины электрофореза нуклеоидов отдельных клеток, окрашенных флуоресцентным красителем. Работа выполнена на ядерных эритроцитах лягушки Xenopus laevis, поскольку земноводные широко используются в качестве биоиндикаторов. С применением классического варианта комета-теста были проведены исследования влияния известных алкилирующих агентов, таких как метилметансульфонат (ММС 0.1-1000 мкМ) и этилметансульфонат (ЭМС 0.001-10 мМ) на структуру ДНК нуклеоида эритроцитов. При инкубации клеток в течение 20 мин при температуре 20-22°С в присутствии низких концентраций алкилирующих агентов интенсивность флуоресценции комплекса ДНК-бромистый этидий в «голове кометы» достоверно (р<0.05) снижалась на 10±5% относительно контроля при концентрации ММС 0.1 мкМ и на 8±3% относительно контроля при концентрации ЭМС 1 мкМ. При концентрациях ММС 1 мМ и ЭМС 10 мМ интенсивность флуоресценции снижалась на 35±6% и 50±10% соответственно при тех же условиях инкубации. Дозовая зависимость эффекта имела нелинейный характер. Полученные результаты показывают эффективность использования "комета-теста" для исследования влияния алкилирующих агентов на геном земноводных.

 

Скорочкина О.Ю.1, Корниенко Н.В.1, Горелов Д.В.2, Якушев Е.Ю.2, Гапеев А.Б.2

1Нижегородский государственный университет им. Н.И. Лобачевского, Н.Новгород (Россия),

2Институт биофизики клетки РАН, Пущино (Россия)