Вы здесь

Главная

Обнаружение и свойства растительной каспазы

ID_Статьи: 
84.00

Программированная клеточная смерть (ПКС), или апоптоз, служит для удаления повреждённых и избыточных клеток и является очень важным процессом для нормального развития всех многоклеточных организмов. Основными исполнителями апоптоза у животных являются каспазы - семейство цистеиновых протеиназ, которые активируются в процессе апоптоза и гидролизуют белки-мишени после остатка аспарагиновой кислоты в специфических сайтах узнавания. Несмотря на то, что ПКС в животных и растительных клетках имеет много общих черт, растительные аналоги каспаз до сих пор не были найдены. Данная работа посвящена доказательству существования и выделению растительной каспазы. В качестве модельного субстрата был использован агробактериальный белок VirD2. Сайты расщепления этого белка каспазой-3 человека были определены с помощью сайт-специфического мутагенеза. Далее было показано, что при апоптозе в листьях табака активируется цистеиновая протеаза(ы), расщепляющая модельный субстрат точно в тех же местах, что и каспаза-3 человека. Растительная каспаза была частично очищена из апоптотических листьев табака с помощью ионообменной хроматографии. На основании идентифицированного сайта расщепления растительной каспазы был сконструирован специфический пептидный ингибитор. Это соединение не только ингибирует растительную каспазу in vitro, но и препятствует развитию апоптоза in vivo.

Таким образом, обнаруженная нами (впервые) растительная каспаза является аналогом каспаз животных, поскольку она:

- имеет ту же специфичность, что и каспаза-3 человека

- активируется в процессе апоптоза

- важна для осуществления апоптоза у растений.

 

Титова Е.С.1, Чичкова Н.В.1, Ким С.Н.2, Тальянский М.Э.2, Вартапетян А.Б.1

1НИИ физико-химической биологии им. А.Н. Белозерского, Московский государственный университет, Москва (Россия)

2Scottish Crop Research Institute, Invergowrie, Dundee (United Kingdom)