Вы здесь

Главная

Новый чувствительный метод оценки состояния митохондрий в организме на выделенных препаратах

ID_Статьи: 
125.00

Известно, что митохондрии (MX) в клетке находятся в тесной связи с эндоплазматическим ретикулумом (ЭР), однако механизмы образования митохондриально-ретикулярной сети в клетке мало исследованы. Это объясняется тем, что возможности проведения биохимических исследований на интактных клетках ограничены, а в условиях опытов с выделенными органеллами нарушено их структурное взаимодействие. Мы разработали условия, позволяющие сохранить нативные блоки митохондриально-ретикулярной сети, ансамбли MX и ЭР. Объектом наших исследований является гомогенат ткани, в частности, печени крысы, полученный в условиях, существенно отличающихся от получения MX принятыми методами. Гомогенат значительно более концентрирован по белку отношение ткани к среде 1:1, сахароза заменена на изотонический хлористый калий, естественный компонент цитозоля. и, наконец, мы заменили традиционное охлаждение до 0-2 °С, которое диссоциирует белки цитоскелета, температурой 14 °С. Исследования этого препарата проводили одновременно методами компьютерной видеомикроскопии и биохимическими методами. В гомогенате хорошо наблюдались энергетические реакции, некоторые из них были выражены лучше, чем на стандартных препаратах MX. Однако обычные препараты MX при хранении теряют некоторые свойства, поэтому процесс их хранения часто заменяют словом старение. Преимуществом ансамблей MX является то, что в процессе хранения они сохраняют способность спонтанно формировать более крупные трехмерные структуры (самоорганизация), что можно рассматривать как восстановление нативной сети. Исследования структурной организации препаратов показали, что способность ансамблей к самоорганизации отражает физиологическое состояние организма даже более чувствительно, чем обычные биохимические показатели. Предлагаемый новый метод исследования функций митохондрий в гомогенатах тканей может использоваться как чувствительный тест оценки энергетического состояния организма.

 

Захарченко М.В., Темнов А.В., Кондрашова М.Н.

Институт теоретической и экспериментальной биофизики РАН, Пущино (Россия)