Вы здесь

Главная

Нитрат кобальта - эффективный контрастер ультратонких срезов для электронной микроскопии

ID_Статьи: 
44.00

Разработана новая методика контрастирования ультратонких срезов, расти­тельных тканей, залитых в эпоновую и эпон-аралдитовую смолу. Фиксация мате­риала проводилась 4%-ым глутаровым альдегидом на 0,1 М K-Na-фосфатном буфере с 4% содержанием сахарозы с последующей дофиксацией 1% OsО4 на том же буфере. В качестве контрастера использовались водные растворы нитрата кобальта в концентрации от 2 до 50%. Палладированные сеточки без формваровой подложки ложились на каплю контрастера, который наносился на дно чашки Петри, покрытое парафином. Время обработки срезов 5-30 мин, после чего сеточки с ними ополаскивались в дистилляте. Препараты просматривались на электрон­ном микроскопе TESLA BS-613 при ускоряющих напряжениях 50, 80 и 100 киловольт и увеличениях от 4,5 до 60 тыс. раз. Получен очень сильный контраст всех без исключения клеточных структур, ничем не уступающий таковому, полученному по общепринятой методике двойного контрастирования с исполь­зованием соединений урана и свинца. Наиболее оптимальные концентрации раствора нитрата кобальта 15-20%, время обработки - 10-20 мин. Большая концентрация раствора может привести к выпадению осадка контрастирующего вещества на поверхности срезов. Предложенная методика предельно проста, занимает мало времени и абсолютно надежна.

 

Тиханков И.А.1 , Лисовец Е.И.2

1 Днепропетровская государственная медицинская академия, Днепропетровск (Украина)

2 Днепропетровский национальный университет, Днепропетровск (Украина)