Вы здесь

Главная

Молекулярно-биологическая детекция и мониторинг Bcr/Abl гена у больных Рн позитивными лейкемиями

ID_Статьи: 
29.00

Развитие и патогенез Ph-позитивных лейкемий сопровождается образованием Рh(филаделъфийской)-хромосомы. Ph-хромосома является продуктом реципрокной транслокации (t(9;22)(q34;q11)), которая приводит к образованию химерного гена Bcr/Abl, белковый продукт которого считают причиной развития ОЛЛ и ХМ (острыйлимфобластный лейкоз и хроническая миелоидная лейкемия).

Для диагностики данной группы заболеваний проводилась качественная оценка наличия в Ph-позитивных клетках химерного белка Bcr/Abl. Известно что в 95% случаев заболеваний ХМЛ и 50% ОЛЛ, больные являются носителями Ph-хромосомы. В течение двух лет методом РТ-ПЦР нами было диагностировано 105 пациентов. Метод РТ-ПЦР является высокочувствительным и позволяет детектировать 105 патологических клеток в периферической крови пациентов. Однако при этом около 1/3 здоровых доноров являются носителями Ph-хромосомы что часто приводит к неверной интерпретации порченных результатов. Во избежание ложнопозитивных результатов диагностики нами были предложены новые подходы для оценки количества транскриптов патологического гена т.к. количество белка Bcr/Abl лимфоцитах пациентов пропорционально тяжести заболевания.

Предполагается, что для определения количества бежа Bcr/Abl можно использовать метод конкурентной полимеразной цепной реакции (ПЦР). Для этого нами была собрана конструкция pUCDbl/Bsal на основе вектора pUC 18, которая включает Dbl кодирующий фрагмент гена Всr/Аbl со вставкой АЗ-В2 размером в 200 вр.

Применение pUCDbl/Bsal позволит дать количественную оценку содержания белка Bcr/Abl в Ph-позитивных клетках, что сделает возможным значительно расширить выбор терапевтических подходов лечения данных заболеваний. По результатам конкурентной ПЦР можно будет оценить эффективность терапии и прогнозировать протекание и отслеживать динамику заболевания, разработать более эффективную стратегию терапии лейкемий.

 

Бровко А.О., Дубровская А.Н.

Институт молекулярной биологии и генетики, Киев (Украина)