Вы здесь

Главная

Изучение уровня малых стабильных нетранслируемых РНК в клетках А431 методом RT-PCR в реальном времени

ID_Статьи: 
8.00

Большинство малых стабильных РЖ, таких как 5S рРНК, тРНК и Аlu-РНК, являются продуктами транскрипции, осуществляемой в эукариотической клетке ДНК-зависимой РНК-полимеразой III. Эти виды РНК участвуют в таких важных процессах, как процессинг РНК, трансляция, сортинг белков и других. Полагают, что уровень данных РНК должен возрастать при переходе клетки к активной пролиферации. Однако до сих пор уровень в клетке малых стабильных нетранелируемых РНК не был исследован с помощью достаточно точных методов. Для решения данной задачи мы применили метод RT-PCR в реальном времени, который является на данный момент самым точным и чувствительным методом количественного определения РНК и успешно применяется для изучения уровня матричных РНК. С помощью данного метода была изучена доля 5S рРНК, TPHKiMctl и Alu-PHK в тотальной РНК клеток эпидермоидной карциномы человека А431, находящихся в состоянии медленной пролиферации при выращивании в бессывороточной среде, в состоянии активной пролиферации под действием эпидермального фактора роста (ЭФР) в низкой концентрации (0,1 нг/мл) и в состоянии апоптоза под действием ЭФР в высокой концентрации (100 нг/мл). Было показано, что исследованная Alu-последовательность не экспрессируется в данных клетках. Доля TPHKiMetl в тотальной РНК возрастает примерно в 1,7 раза в активно пролиферирующих клетках (относительно контроля - медленно пролиферирующих клеток) и остается высокой в апоптотических клетках. Доля 5S рРНК практически не меняется при переходе клеток к активной пролиферации, но очень высока в апоптотических клетках.

 

Никитина Т.В.1,2, Назарова Н.Ю.3, Тищенко Л.И.2, Туохимаа П.3, Седова В.М.1

1Институт цитологии РАН, Санкт-Петербург (Россия)

2Санкт-Петербургский грсударственный университет (Россия)

3Медицинская школа при университете Тампере (Финляндия).