Вы здесь

Главная

Исследование возникновения гетероплазмии митохондриальной ДНК в тканях Г-облученных мышей

ID_Статьи: 
22.00

В митохондриальной ДНК (мтДНК) при действии эндогенных активных форм кислорода и экзогенных химических и физических агентов образуется значительно большее количество повреждений, чем в ядерной ДНК (я ДНК). Частота мутаций, регистрируемая в мтДНК культивируемых клеток, в 20-100 раз выше, чем в соразмерном фрагменте я ДНК. Поэтому в клетках млекопитающих часто обнаруживают наряду с нормальными копиями и делегированные копии мтДНК. Такой статус называют гетероплазмией мтДНК. Возникновение гетероплазмии приводит к развитию множества "митохондриальных" болезней, ускорению старения клеток, злокачественной трансформации и гибели клеток. Целью данной работы является сравнительная оценка уровня гетероплазмии в митохондриях постмитотических и активно пролиферирующих тканей, а также сравнение по этому параметру нормальных тканей с опухолевыми. Мы провели исследование образования делеций в мтДНК тканей головного мозга и селезенки (постмитотическая и пролиферирующая, соответственно) мышей спустя 5 суток после облучения ионизирующей радиацией (ИР) в сублетальной дозе, а также в мтДНК клеток перевиваемой асцитной карциномы Эрлиха (с повышенной нестабильностью генома). Возникновение делеций регистрировалось по появлению минорных фрагментов в продуктах амплификации мтДНК методом Long Extension PCR в режимах длительного или сокращенного периодов элонгации. Обнаружено, что в ткани головного мозга облученных мышей и в опухолевых клетках, взятых от животных, облучавшихся на вторые сутки после прививки АОЭ, наблюдается снижение выхода полноразмерного продукта (15,9 kb) и появление форм мтДНК с делениями. Проявление эффектов ИР для селезенки, по итогам предварительных экспериментов, менее выражено. Т.о., в разных тканях мышей выявлено отличие уровня ГЩР-амплификации 15,9 kb фрагмента мтДНК, обнаружена разная степень гетероплазмии генома митохондрий.

 

Петрова Е.А., Фоменко Л.А., Безлепкин В.Г., Газиев А.И.

Институт теоретической и экспериментальной биофизики РАН, Пущино, Россия