Вы здесь

Главная

Исследование репарации митохондриальной ДНК опухолевых и нормальных клеток мышей после гамма-облучения

ID_Статьи: 
11.00

Ряд данных, полученных на клетках, показывает, что митохондриальная ДНК (мтДНК) по сравнению с ядерной более уязвима для повреждающих агентов. Накопление в мтДНК нерепарированных повреждений может приводить к дисфункции митохондрий, нарушению многих клеточных процессов и развитию апоптоза клеток. Известно, что клетки многих типов опухолей, по сравнению с нормальными клетками, более резистентны к действию генотоксических агентов. Эти данные позволяют предполагать, что в опухолевых клетках повреждения ядерной ДНК, возможно, репарируются более эффективно, чем в нормальных клетках. В настоящем исследовании мы попытались изучить эффективность репарации мтДНК в опухолевых клетках и клетках тканей опухоленосителей - мышей, облученных у-радиацией. Для проведения анализов использовался метод количественной ПЦР. Синтезировали фрагмент размером 15983 п.о. (97% длины мтДНК мыши) на образцах ДНК, выделенных из клеток перевиваемой асцитной карциномы Эрлиха, тканей головного мозга и селезенки мышей, облученных г-радиацией в дозе 15 Гр. Снижение выхода продукта ПЦР за счет появления повреждений в мтДНК оценивалось по уменьшению флуоресценции в агарозных гелях при окраске EtBr. Результаты предварительных экспериментов. демонстрируют существенное снижение уровня амплификации в мозге и селезенке сразу после облучения мышей (в среднем составляет 64% от контрольного). Данный эффект менее выражен в асците (30% от контроля). Уменьшение количества продукта ПЦР, вероятно, обусловлено наличием в амплифицируемых фрагментах повреждений, блокирующих синтез.Также выявлено различие кинетики репарации мтДНК в течение 180 мин. после облучения в покоящейся и пролиферирующей тканях, а также в клетках опухоли. Обсуждается возможность взаимодействия ядерного и митохондриальнго геномов в опухолевых клетках, подвергавшихся воздействию генотоксических агентов.

 

Антипова В.Н.. Малахова Л.В., Безлепкин В.Г., Газиев А.И.

Институт теоретической и экспериментальной биофизики РАН, Пущино, Россия