Вы здесь

Главная

Исследование гепарин-связывающей активности гликопротеина gB вируса болезни ауески (Suid herpesvirus 1)

ID_Статьи: 
35.00

Вирус болезни Ауески (ВБА, Suid herpesvirus 1) является типичным пред­ставителем альфа-герпесвирусов и вызывает широко распространенное забо­левание различных видов животных. Гликопротеин gB ВБА принадлежит к классу наиболее консервативных гликопротеинов герпесвирусов и играет цен­тральную роль в процессе проникновения вируса в клетки. Мы показали, что одним из клеточных рецепторов gB ВБА являются гепаран-сульфаты плазма­тических мембран. Так как аминокислотная последовательность gB ВБА не содерх<ит явной линейной гепарин-связывающей консенсусной последователь­ности, целью данной работы было исследование механизма взаимодействия gB ВБА с гепаран-сульфатами клеток.

Исследования проводили в модельных экспериментах, определяя связыва­ние gB ВБА с иммобилизованным гепарином - структурным аналогом гепа-ран-сульфата. В работе использовали меченный [35S|-метионином gB, очищенный из вирионов ВБА с помощью аффинной хроматографии на основе gB-специфических моноклональных антител. Чистота выделенного gB составляла 98-99%, gB сохранял нативную структуру и не был подвержен протеолитичес-кой деградации. Гликопротеин gB ВБА связывался с гепарин-сефарозой и спе-( цифически злюировался гепарином. В присутствии гепарина наблюдалось ин-гибирование связывания gB с гепарин-сефарозой. Денатурация gB с помощью дитиотреитола и додецилсульфата натрия, контролируемая по исчезновению реактивности gB-специфических моноклональных антител с конформационны-ми эпитопами гликопротеина, сопровождалось снижением связывания gB с иммобилизованным на сефарозе гепарином на 70-80%. Полученные данные свидетельствуют, что гепарин-связывающий сайт гликопротеина gB ВБА, явля­ется, по крайней мере частично, конформационно-зависимым.

 

Врублевская В.В., Корнев А.Н., Моренков О.С.

Институт биофизики клетки РАН, Пущино