Вы здесь

Главная

Исследование факторов, влияющих на определение эффективности ингибиторов множественной лекарственной устойчивости опухолей

ID_Статьи: 
44.00

Явление множественной лекарственной устойчивости известно для различных биологических объектов - бактерий, простейших, грибов и клеток млекопитающих. Одним из основных факторов МЛУ является наличие в плазматической мембране транспортных белков, откачивающих различные соединения из клетки против градиента концентрации. Это существенно затрудняет терапию широкого класса заболеваний, включая онкозаболевания. Очевидна необходимость поиска эффективных и безопасных ингибиторов белков-транспортеров. Скрининг ингибиторов МЛУ опухолей осуществляется на устойчивых опухолевых клетках с использованием флюоресцирующих субстратов транспортных белков. Эффективность ингибиторов оценивается по максимальному увеличению флюоресценции в клетках и по концентрации ингибиторов, при которой флюорес­ценция равна половине максимальной. В настоящей работе исследовали факторы, которые могут влиять на параметры скрининга, и, следовательно, искажать оценку эффективности ингибиторов МЛУ. Исследовали влияние ингибиторов транс­портных белков ивермектина и циклоспорина А на клетки лимфолейкоза мышей Р388, резистентных к винкристину. Функциональную активность транспортных белков определяли флюориметрическим методом. В качестве флюоресцирующих субстратов использовали кальцеин AM и родамин 123. Было показано, что величина увеличения флюоресценции кальцеина и родамина зависит от концентрации красителя и длительности инкубации с ним. Была исследована зависимость коэффициента увеличения флюоресценции от концентрации сыворотки в среде для циклоспорина А и ивермектина. Показано, что сыворотка влияет как на максимальный коэффициент, так и на эффективные концентрации, причем по-разному для двух ингибиторов.

 

Ермакова Н.В., Путин А.С.

Институт теоретической и экспериментальной биофизики РАН, Пущино