Вы здесь

Главная

Интеграза ВИЧ-1: ингибирование каталитической активности модифицированными олигонуклеотидами

ID_Статьи: 
60.00

В контексте поиска новых эффективных препаратов против СПИДа активно проводятся работы по созданию ингибиторов интегразы - одного из основных ферментов вируса иммунодефицита человека (ВИЧ), вызывающего СПИД. Интеграза осуществляет ключевую стадию в репликативном цикле ВИЧ - интеграцию вирусной ДНК в геном зараженной клетки. Ранее было показано, что конъюгаты коротких олигонуклеотидов с ароматическими молекулами-интеркаляторами являются эффективными неконкурентными ингибиторами интегразы in vitro. Они подавляют каталитическую активность фермента, вызывая диссоциацию фермент-субстратного комплекса. Однако, применение данных конъюгатов, как ингибиторов интеграции in vivo, ограничивается их низкой устойчивостью к нуклеазному гидролизу и высокой цитотоксичностью интеркаляторов. В настоящей работе с целью оптимизации структуры олигонуклеотидных ингибиторов синтезированы конъюгаты устойчивых к гидролизу модифицированных по сахаро-фосфатному остову олигонуклеотидов с молекулами, не обладающими заметной цитотоксичностью: флюоресцеином, эозином, холестерином и рядом других. Изучено действие данных соединений на каталитическую активность интегразы. Исследования показали, что на эффективность ингибирования конъюгатами существенно влияют ароматичность и гидрофобность ненуклеотидной части, ее положение (3'- или 5'-конец олигонуклеотида), а также длина и гидрофобность олигонуклеотидной части. По результатам исследований, наиболее перспективными ингибиторами интегразы ВИЧ-1 являются конъюгаты тиофосфоамидных и 2'-0-метильных олигонуклеотидов с эозином и флюоресцеином. Наномолярные концентрации данных конъюгатов вызывают 50% снижение активности интегразы. Важно, что при этих концентрациях они не оказывают влияния на активность других ДНК-связывающих ферментов.

 

Приказчикова Т.А., Готтих М.Б.

Химический факультет МГУ им. М.В.Ломоносова, Москва (Россия)