Вы здесь

Главная

Иммунологический анализ субъединичного состава б-РНП и 26S протеасом клеток млекопитающих

ID_Статьи: 
79.00

За последние несколько лет исследование протеасом стало одной из «горячих» точек молекулярной биологии клетки. Они участвуют в регуляции транскрипции, контроле клеточного цикла, проведении сигнала, иммунном ответе, деградации поврежденных и нормальных белков. В ядрах и цитоплазме эукариотических клеток выявлены специфические рибонуклеопротеиновые комплексы а-РНП, - содержащие малые РНК. Ранее нами было обнаружено сходство стерических размеров а-РНП и 26S протеасом и констант их седиментации в градиенте плотности сахарозы. а-РНП обладают такими же ферментативными свойствами, что и 26 S протеасомы - протеолитическими и эндорибонуклеазными активностями.

Однако, а-РНП частица более устойчива к воздействию детергентов, солей и кислот, чем 26S протеасомы. В настоящей работе анализировали субъединичный состав а-РНП и 26S протеасом с помощью электрофореза в ПААГ с додецилсульфатом натрия. В результате обнаружены различия по содержанию высокомолекулярных белковых субьединиц а-РНП и 26S протеасом. С помощью иммуноблоттинга с использованием моноклональных антител к субъединицам 20S протеасомы в а-РНП выявлены субъединицы коровой частицы 26S протеасомы. С помощью иммуноблоттинга с использованием смеси антител к 26S протеасомам проведен сравнительный анализ белкового состава а-РНП, полученных из почек крыс, и протеасом, выделенных из клеток печени и почек крыс, клеток эпидермоидной карциномы человека линии А431, проэритролейкемических клеток человека линии К562 и фибробластов мыши NIH ЗТЗ. Показано, что состав б-РНП и 26S протеасом сходен в клетках общего тканевого происхождения и что состав 26S протеасом существенно различается в клетках различного происхождения. Полученные результаты позволяют высказать предположение о том, что а-РНП представляет собой специфическую, содержащую РНК, субпопуляцию 26S протеасом.

 

Цимоха А.С., Волкова И.В., Ермолаева Ю.Б., Медведева Н.Д., Евдонин А.Л., Константинова И.М.

Институт цитологии РАН, Санкт-Петербург (Россия).