Вы здесь

Главная

Идентификация генов, участвующих в процессах биосинтеза компонентов клеточной стенки дрожжей Hansenula polymorpha

ID_Статьи: 
58.00

Дрожжевая клетка полностью покрыта клеточной стенкой (КС). В данной органелле располагаются рецепторы, и она осуществляет контроль метаболических процессов факторами внешней среды. Основными структурными компонентами клеточной стенки дрожжей являются полисахариды (глюкан и хитин) и маннопротеины, несущие N- или О-гликозидные цепи. Современное представление о строении дрожжевой клеточной стенки в основном базируется на изучении дрожжей Saccharomyces cerevisiae и Candida albicans. Однако её структура может существенно отличаться у других видов дрожжей. В настоящей работе мы изучали КС Hansenula polymorpha. Для этого были получены мутанты с нарушениями в структуре клеточной стенки. Получение мутантов осуществляли недавно разработанным методом случайной интеграции линейных фрагментов ДНК. Отбор мутантов проводили по потере способности расти в присутствии соединений, дестабилизирующих КС-ортованадата, додецилсульфата натрия и Конго красного. В некоторых случаях были определены гены, в которых произошли мутации, ответственные за эти нарушения. В полученных штаммах была проанализирована степень N- и О-гликозилирования белков. Показано, что мутация в гене РМТ1, приводит к снижению степени О-гликозилирования белков, а мутации в генах MNN4, VPS35, YPT6, RFG1 приводят к изменению свойств N-гликозидных цепей белков. Было обнаружено нарушение белкового состава клеточной стенки штаммов, несущих мутации в генах YPT6, MNN1, PMR1. У большинства мутантов выявлены морфологические изменения, например, изменение формы клеток, образование клеточных агрегатов, псевдомицелиальный рост. В результате проведенной работы была получена обширная информация о генах, прямо или косвенно участвующих в формировании клеточной стенки дрожжей.

 

Плотникова Т.А.1, Соколов С.С.1, Агафонов М.О.2, Калебина Т.С.1, Кулаев И.С.1

1Биологический факультет МГУ им. Ломоносова, Москва (Россия)

2ФКНПК МЗ РФ, Москва (Россия).