Вы здесь

Главная

Гетерологическая экспрессия генов биосинтеза ландомицина Е в модельных штаммах стрептомицетов

ID_Статьи: 
137.00

 

Одним из подходов к получению новых антибиотиков является комбина­торный биосинтез, осуществляемый при помощи переноса генов биосинтеза между различными штаммами актиномицетов. Этот подход требует наличия соответствующего набора клонированных и изученных генов биосинтеза анти­биотиков. Одним из источников таких генов является S. globisporus 1912 -продуцент нового противоопухолевого антибиотика ландомицина Е (ЛЕ), относя­щегося к группе ангуциклинов.

Для изучения возможности гетерологической экспрессии генов биосинтеза ЛЕ, фрагмент кластера с генами «минимальной» поликетидсинтазы (IndA, В, С), кеторедуктазы (IndE) и поликетидциклазы (IndF), был клонирован в интегра-тивный вектор pSET152. Полученная рекомбинантная плазмида pSN6 была пе­ренесена при помощи межродовой конъюгации из Е. coli ЕТ12567 в штаммы S. coelicolor СН999 и S. lividans ТК24. Анализ метаболитов, образуемых транс-конъюгантами, показал, что S. lividans ТК24 pSN6+ синтезирует новое соедине­ние с максимумом поглощения света в области 282 нм. Замещение гена в-кетоацилсинтазы IndA в S. lividans ТК24 pSN6+ на ген устойчивости к канами-цину aphll привело к прекращению синтеза указанного соединения. Это свиде­тельствует о том, что его синтез штаммом S. lividans ТК24 pSN6+ обусловлен активностью клонированных lnd-генов. Мы не обнаружили изменений в био­синтезе метаболитов штаммами S. coelicolor СН999 pSN6+. Клонирование в этих трансконъюгантах гена-активатора поликетидного биосинтеза lkmR из S. griseus не влияло на активность lnd-генов. Из lnd-кластера S. globisporus 1912 был клонирован ген lndl, кодирующий позитивный регулятор транскрипции струк­турных генов биосинтеза ЛЕ. Представляются данные о его влиянии на актив­ность lnd-генов, клонированных в гетерологических штаммах актиномицетов.

 

Ребец Ю.В., Осташ Б.О.

Львовский национальный университет, Львов (Украина)