Вы здесь

Главная

Гетерохроматиновые повторы Stellate Drosophila melanogaster могут вызывать компактизацию прилегающего гена-репортера

ID_Статьи: 
13.00

Эффект положения мозаичного типа (ЭПМ) проявляется в нестабильной мозаичной инактивации генов эухроматина, перенесенных в гетерохроматин. Блок клонированных гетерохроматиновых повторов Stellate размером 8 т.п.о. также приводит к эффекту положения репортерного гена mini-white. ЭПМ в данном случае отличается от инактивации, вызываемой крупными блоками гетерохроматина, в частности, характер инактивации не изменяется на фоне мутаций по ряду известных генов-модификаторов ЭПМ, что поставило вопрос об особенностях компактизации хроматина в районе гена-репортера. Цель настоящей работы - определить, изменяется ли структура хроматина репортерного гена при его инактивации повторами Stellate? Для этого использовали метилтрансферазный анализ. Доступность ДНК метилтрансферазам определяется структурой хроматина. Чем сильнее инактивация гена, тем компактнее структура хроматина, и, тем больше она будет препятствовать метилированию гена. Эндогенное метилирование у дрозофилы находится на чрезвычайно низком уровне, поэтому для изучения доступности хроматина использовали искусственно введенную в геном метилтрансферазу Escherichia coli. Степень метилирования, определяющую компактизацию хроматина, оценивали с помощью рестриктного анализа, используя эндонуклеазы, чувствительные к метилированию ДНК. Обнаружено, что инактивация гена mini-white сопровождается снижением его метилирования по сравнению с активным эухроматиновым mini-white. Доступность гена mini-white для Dam-метилтрансферазы Е. coli при инактивации в 1,5-2 раза меньше, чем у полностью активного гена, т.е. повторы Stellate приводят к формированию более компактной структуры хроматина. Таким образом, клонированные гетерохроматиновые повторы Stellate могут вызывать компактизацию окружающего эухроматина в сайтах инсерции.

 

Оленкина О.M.

Московский Государственный Университет им. М.В.Ломоносова, Москва (Россия)