Вы здесь

Главная

Анализ вариабельности молекулярно-генетических маркеров для оценки трансгенерационных эффектов воздействия на самок мышей ионизирующей радиации

ID_Статьи: 
60.00

Есть основания полагать, что повреждение генома половых клеток грызунов ионизирующей радиацией приводит к индукции нестабильности генома (НСГ) в поколениях их потомства. Доказательства феномена трансгенерационной трансмиссии мутационных изменений были, в основном, получены по результатам обследования потомства, рожденного от облученных самцов и интактных самок. Особенности биологии мужских и женских гамет не позволяют использовать результаты исследования НСГ у потомства облученных самцов для оценки радиационного риска в поколениях животных, рожденных самками после такой же радиационной нагрузки. В представленном сообщении предлагается разработка экспериментального подхода для выявления и оценки уровня изменений в геномной ДНК соматических клеток потомства (Fj-поколения) самок мышей BALB/с, подвергавшихся рентгеновскому облучению в дозах до 200 сГр. Для оценки индуцированной вариабельности ко-доминатно наследуемых микросателлитных аллелей обоих родителей было использовано определение уровня полиморфизма размеров продуктов полимеразной цепной реакции, генерируемых "случайным праймером" на ядерной ДНК (AP-PCR) тканей потомства. С учетом того, что митохондриальный геном у животных наследуется исключительно по материнской линии, для выявления трансгенерационных эффектов радиационного поражения материнских гамет применяется ПДРФ-анализ продукта амплификации (Long Extention PCR) фрагмента мтДНК размером 8636 п.о. Изображения окрашенных серебром или бромистым этидием гелей после электрофоретического разделения продуктов амплификации/рестрикции фиксируются в виде файлов графического формата с системой DOC-PRINT DP-001.FDC (Vilber Lourmat, Франция). Оцифровка и анализ ДНК-фингерпринтов выполняются с применением программ WinDig 2.5 (©CopyRight 1994-1996 D.Lovy), MS Excel, а также разработанной в лаборатории специальной утилиты.

 

Новицкий С.С., Ломаева М.Г., Безлепкин В.Г.

Институт теоретической и экспериментальной биофизики РАН, Пущино (Россия)