Вы здесь

Главная

Анализ радиационно-индуцированной нестабильности генома у потомства мышей линии BALB/c с помощью RAPD

ID_Статьи: 
47.00

Результаты многих исследований показывают, что у потомства родителей, подвергавшихся воздействию ионизирующей радиации, высока вероятность радиационной индукции нестабильности генома (НСГ). Нестабильность генома проявляется как повышение частоты хромосомных и генных мутаций, вариабельности микро- и мини-сателитных локусов, повышение вероятности опухолевых процессов, уровня амплификации генов и т.д. Целью нашей работы было зарегистрировать геномную нестабильность у потомков мышей-самцов линии BALB/c, облученных гамма -радиацией в дозе 3 Гр (ГУПОС-1, 4,5 Гр/мин, 137Cs) с помощью RAPD (random amplified polymor­phic DNA) с серией случайных праймеров. Через 3 месяца после облучения скрестили с самками линии BALB/с. Полученное потомство забивали в возрасте 3-4 недель, из печени выделяли ДНК наборами для выделения ДНК (ООО «Изоген»). Для анализа нами были отобраны девять 18 и 20-членных праймеров, которые использовались как одиночные и в смесях. Реакции ставили на готовых ПЦР-смесях производства ООО «Изоген». Продукты ПЦР разделяли в 1,5%-ном агарозном геле с последующим анализом количества полос. Мы обнаружили достоверное различие между контрольной и опытной группой по таким параметрам, как количество новых полос и средняя частота их появления. В зависимости от праймера, частота появления новых полос на одно животное в опытной группе увеличивалась в 3-10 раз по отношению к контрольной группе. Следовательно, мы обнаружили полиморфизм ПЦР-продуктов у потомков облученных мышей-самцов, как следствие возникающей нестабильности генома. Нами также отработана методика RAPD с использованием серии 20-ти членных праймеров.

 

Мязин А.Е., Сафонов А.В., Шайхаев Г.О., Померанцева М.Д., Шевченко В.А.

Институт Общей Генетики им. Н.И. Вавилова РАН, Москва (Россия)