Вы здесь

Главная

Анализ микросателлитного полиморфизма в клетках крови и лимфолейкоза мышей

ID_Статьи: 
95.00

Высокий диагностический потенциал полимеразной цепной реакции (PCR) был продемонстрирован в ряде исследований в отношении выявления разного рода опухолей. Возможность идентификации одной лимфомной клетки на 106 в костном мозге и в периферической крови, как полагают, обусловлена изменени­ем характера амплификации специфического локуса («хрупкого сайта») в про-тоонкогене BCL2 вследствие транслокации t (14:18). Характерная для раковых клеток нестабильность генома проявляется не только высокой вероятностью транслокации внутригенных последовательностей, но и полиморфизмом меж­генных микросателлитных (МКС) блоков. В представленном сообщении описа­ны результаты исследования, целью которого является попытка использования PCR со «случайно выбранным» праймером (AP-PCR) для идентификации экспе­риментального лимфолейкоза мышей линии DBA/2. Сравнивали исходный штамм Р-388 и адаптированный к цитостатику винкристину (R-6). Препараты ДНК, изолированные из опухоли, крови и тканей кончика хвоста использовали, в качестве матрицы в AP-PCR с 20-нуклеотидным праймером (фрагмент после­довательности, фланкирующий МКС- блок в районе гена р53 на 11 хромосоме). Изображение гелей после разделения сложного набора продуктов амплифика­ции в 6% ПААГ, окрашивались азотнокислым серебром и оцифровывались. Проводилось сравнение ДНК-фингерпринтов на основе определения величин электрофоретической подвижности и размеров индивидуальных продуктов. Предварительные результаты демонстрируют повышенный уровень полимор­физма длин амплифицированных в AP-PCR МКС-ассоциированных фрагмен­тов геномной ДНК клеток лимфолейкоза мышей по сравнению с клетками ткани хвоста и крови. Обсуждается возможность использования различных ко­личественных параметров МКС полиморфизма для характеристики генотипа клеток лимфолейкоза.

 

Ляпина О.В., Ермакова Н.В., Пушин А.С., Безлепкин В.Г.

Институт теоретической и экспериментальной биофизики РАН, Пущино