Вы здесь

Главная

Альтернативный сплайсинг РНК гена XIST у полевок рода Microtus группы Arvalis

ID_Статьи: 
40.00

Процесс инактивации одной из двух Х-хромосом происходит в раннем раз­витии в соматических клетках самок млекопитающих и является необходи­мым для компенсации дозы генов, расположенных на Х-хромосоме. Ген Xist (X inactive specific transcript), располагющийся на Х-хромосоме,играет,возможно,клю-чевую роль в Х-инактивации. Он имеет размер более 20 т.п.н. и состоит из 8 экзонов различной протяженности. Ген Xist экспрессируется только на неак­тивной Х-хромосоме и кодирует нетранслируемую РНК длиной 15-17 т.н., которая покрывает эту хромосому. Известно, что становление неак­тивного статуса Х-хромосомы связано со стабилизацией транскрипта гена Xist.

В данной работе методом RT-PCR изучался альтернативный сплайсинг РНК гена Xist у полевок. Выделяли РНК из культуры клеток (фибробластов) или из печени взрослых самок полевок. При проведении синтеза кДНК с использовани­ем цепь-специфичных праймеров были выявлены продукты различной протяжен­ности, которые далее клонировали определяли их нуклеотидные последовательности. При сравнении нуклеотвдных последовательностей ДНК рекомбинант-ных клонов с последовательностью геномной ДНК было обнаружено, по крайней мере, три варианта, образующиеся в результате альтернативного сплайсинга, РНК гена Xist полевок: без экзона 7; без большей части экзона 3, полноразмерных экзо-нов 4, 5, 6, и части экзона 7; без экзонов 4, 5,6, 7. Кроме того, методом RT-PCR было подтверждено существование «длинного» экзона 7 с предположительной Загра­ницей в центре интрона 7. Обнаруженные варианты сплайсинга транскрипта гена Xist у полевок не затрагивают лишь 1 и 2 экзоны, также как и в случае человеческого rem Xist. Не исключено, что нуклеотидная последовательность именно этих экзонов играет определяющую роль в процессах связывания про­дукта гена Xist с хроматином, что приводит к инактивации одной из двух X-хромосом.

 

Григорьева Е.В., Павлова М.Е.

Институт цитологии и генетики СО РАН, Новосибирск