Вы здесь

Главная

Активность в-глюкозидазы в онтогенезе Pisum sativum L.

ID_Статьи: 
59.00

Исследовали различные формы в-глюкозидазы (КФ 3.2.1.21) проростков Pisum sativum, расщепляющий специфический для этого растения изосукцинимид-р-гликозид (ИС - гликозид). Ранее нами было установлено существование двух форм (b-глюкозидазы и исследованы некоторые физико-химические свойства цитоплазматической формы фермента, а также показано, что его активность меняется в онтогенезе растений (Ершова и др., 2001). Для клеточносвязанной b-глюкозидазы подобных исследований ранее не проводилось.

Тип связывания b-глюкозидазы с клеточными стенками устанавливали, обрабатывая фосфатноцитратным буфером (адсорбированная форма), 1М NaCl (ионносвязанная форма), оставшуюся фракцию фермента считали ковалентносвязанной клеточной формой. Активность фермента рассчитывали в ФЕ на мг бежа, используя в качестве субстрата ИС-гликозид, который выделяли из растений методом бумажной хроматографии (Ершова, 1978). Растения до 3-х недельного возраста выращивали на водопроводной воде при + 25° С, освещенность 1000 люкс/см*2 и фотопериоде 12 час.

Установлено, что в листьях 2-х недельных проростков гороха присутствуют адсорбированная, ионно- и ковалентносвязанные молекулярные формы в-глюкозидазы с удельной активностью 10,64; 18,50 и 5,98 ФЕ/мг1 белка соответственно. Цитоплазматическая в-глюкозидаза имела активность 2,31 ФЕ/мг1 бежа. Показано, что при прорастании семян в надземной части 5-дневных проростков гороха активность всех форм клеточносвязанной в-глюкозидазы была выше, чем цитоплазматической на всех этапах развития растений. Максимальная активность принадлежала ионносвязанной форме в-глюкозидазы. При прорастании до 12-дневного возраста активность всех клеточносвязанных форм в-глюкозидазы возрастала в 1,5 - 3 раза, а затем резко снижалась.

Таким образом, нами впервые были выделены три молекулярные формы клеточносвязанной р-глюкозидазы, расщепляющий ИС-гликозид, и показаны изменения их активности в онтогенезе растений P. sativum.

 

 

Гущина Н.А., Зязин А.А., Ершова А.Н.

Воронежский государственный педагогический университет, Воронеж (Россия)